活細胞掃描分析儀是一種集成多種先進技術的設備,用于實時監(jiān)測和分析活細胞的狀態(tài)與行為。以下是其組成和工作原理的具體介紹:
一、設備組成
1. 光學成像系統(tǒng):采用倒置顯微鏡結(jié)構,集成相襯聚光鏡、高數(shù)值孔徑物鏡及高靈敏度相機(如CMOS/sCMOS傳感器),支持明場、相差、熒光等多種成像模式。部分型號配備超分辨技術(如SIM/STED)或全息成像模塊,可實現(xiàn)亞微米級分辨率與無標記3D重構。
2. 自動化控制模塊:包含電動物鏡切換、電動載物臺(行程可達115×75mm)、自動對焦系統(tǒng)(遠紅外激光識別焦平面)及程序化操作界面,支持自定義掃描區(qū)域、時間間隔及多孔板連續(xù)成像。
3. 環(huán)境維持單元:內(nèi)置恒溫恒濕控制系統(tǒng)(溫度±0.5℃,濕度±5%RH),適配CO?培養(yǎng)箱環(huán)境;采用低光毒性設計(如GR熒光光源+智能視場光闌),減少長時間觀測對細胞活性的影響。
4. 智能分析軟件:集成AI算法實現(xiàn)細胞計數(shù)、融合度分析、劃痕愈合率計算等功能,并可生成生長曲線、動態(tài)視頻及統(tǒng)計學圖表。深度學習模型還能輔助識別細胞周期階段或凋亡特征。
二、工作原理
1. 光學成像與信號采集:通過多通道LED光源激發(fā)特定波長熒光(如DAPI/GFP/Texas Red),結(jié)合濾光片分離發(fā)射光譜,捕獲細胞形態(tài)及分子標記信息。高速相機以最高40幀/秒速率記錄動態(tài)過程,配合Z軸分層掃描實現(xiàn)三維重建。
2. 非侵入式傳感技術:部分設備采用微電極陣列檢測細胞貼附引起的阻抗變化,將生理活動轉(zhuǎn)化為電信號,量化增殖速率與存活狀態(tài)。此類技術無需染色即可連續(xù)監(jiān)測,適用于干細胞擴增質(zhì)控等場景。
3. 自動化流程管理:預設實驗模板可一鍵啟動多孔板全景掃描或延時攝影任務,系統(tǒng)自動校準曝光參數(shù)并追蹤選定區(qū)域。遠程控制功能允許通過網(wǎng)絡實時查看數(shù)據(jù),降低人為干預導致的污染風險。
4. 數(shù)據(jù)處理與可視化:原始圖像經(jīng)去噪、分割后提取單細胞輪廓,計算面積、遷移軌跡等參數(shù)。時間序列數(shù)據(jù)則生成劑量效應曲線或分化趨勢圖,支持藥物篩選結(jié)果的直觀對比。